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南宫28培养人肾癌细胞SKRC20的方法

来源:寿光罡 日期:2025-09-15

南宫28的细胞培养条件如下:在细胞接收后,应将其处理到良好状态,然后灌满完全培养液并封好瓶口,这是运输细胞的最佳方式。收到细胞后,请勿立即打开瓶盖,及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购信息一致,并检查瓶身是否完好无损,是否存在漏液等异常情况。如未发现问题,请在显微镜下观察细胞的生长情况,并拍摄不同倍数的照片(推荐40x, 100x, 200x各一张)保存,以便后续售后参考。前三天的照片是重要凭证,未提供照片将默认细胞状态良好。

南宫28培养人肾癌细胞SKRC20的方法

以下是南宫28的贴壁细胞传代步骤:

  1. 弃去培养上清液,使用不含钙、镁离子的PBS轻柔洗涤细胞1-2次。
  2. 向培养瓶中添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液,放入37℃培养箱中消化1-2分钟,观察细胞消化情况。若细胞大部分变圆并开始脱落,请迅速将瓶子取回操作台,轻轻敲击几下后加入5ml以上的完全培养基以终止消化。
  3. 轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,并将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM的条件下离心5分钟,弃去上清液,然后加入1-2ml完全培养基重悬细胞。
  4. 将细胞悬液按1:2的比例分至两个新的T25培养瓶中,补充新鲜完全培养基至每瓶5-8ml,最后放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。

悬浮细胞传代步骤如下:

  1. 采用半换液法处理,竖放培养瓶在培养箱中静置约1小时,轻轻吸去约3ml培养基后补充3ml完全培养基。如果培养基变色速度较慢,可以直接加入约500µl的FBS。在传代时可以直接补充5ml培养基分为两个培养瓶,通常这样传代3次后可进行一次离心传代,以去除死细胞。
  2. 离心换液法:若需分瓶,将细胞悬液收集到离心管中以1000RPM离心5分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后重悬混匀,将细胞悬液按1:2的比例分配至新的T25瓶中,并加入新的完全培养基,以保持细胞生长活力。后续传代可依据实际情况按1:2到1:5的比例进行。

关于细胞冻存,南宫28的步骤如下:

  1. 当细胞生长至覆盖培养瓶约80%面积时,弃去T25培养瓶中的培养液,并用PBS清洗一次细胞。
  2. 添加约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液,倒置并根据显微镜观察,当细胞回缩并变圆时,加入5ml完全培养液终止消化,轻轻吹打以使细胞脱落。将悬液转移至15ml离心管中,1000RPM离心5分钟。
  3. 弃去上清,沉淀细胞后加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),充分混匀后转移入冻存管中。
  4. 将冻存细胞直接放入-80℃的冰箱中,如需转入液氮罐,则需在-80℃冰箱中存放超过24小时后再转入液氮罐。

南宫28特别注意:某些细胞可能贴壁不牢,在运输过程中容易发生脱落,这是正常现象。如脱落较多,可以将培养瓶内的培养液收集至离心管,1000RPM离心5分钟,收集上清液作为过渡培养,然后沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打后重悬,消化1-2分钟后加5ml完全培养基终止反应,再离心,弃去上清,加入1-2ml完全培养基重悬。接着按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。

南宫28在细胞出现问题时,可重发的情况包括:运输过程中细胞丢失、瓶身破损、严重漏液等;细胞污染问题需在收到产品48小时内提供真实实验结果;常温或干冰运输的细胞复苏后24小时内细胞未存活的情况;未开封的运输细胞出现污染等。关于不予重发的情况包括客户造成的细胞污染、操作不当导致的细胞状态不良等。

如在使用南宫28细胞时遇到问题,请根据以上指南进行操作,并与我们的技术团队沟通,我们将竭诚为您服务。

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